| 中文名称 |
PBMC/NK专用冻存液 |
| 英文名称 |
PBMC/NK Specific Cryopreservation Solution |
BDBIO PBMC/NK专用冻存液是一款专门针对血液来源的PBMC及脐血干细胞冻存而设计的 非即用型冻存液，本产品无血清，无其他异源成分，使用前需添加灭活自体血浆使用，达到 高安全性。
使用方法
（一）配制即用型冻存液1.取新鲜外周血（枸橼酸钠抗凝），300g，离心10min。2.自体血浆制备：（1）取上半部分2/3的血浆层，放入50ml离心管中，56℃，灭活30min（2）取出离心管，放入-20℃静置10min（3）取出离心管，4℃，1100g，离心15min（4）取出上面部分澄清血浆层，放入新50ml离心管中3.即用型冻存液配制：灭活后血浆：冻存液按照1:4比例混合，即可成即用型冻存液。（例：800ul冻存液加200ul灭活血浆）（二）细胞冻存及复苏1.人外周血单个核细胞收集取新鲜人外周血，使用枸橼酸钠抗凝后，离体2h内做PBMC分离，参照样本密度分离液操作规程分离获得。2.细胞冻存将收集的PBMC用细胞保存液重悬，使其浓度为1*107/ml（可根据实际实验需求进行调整）。分装至冻存管中，每管1ml，放置于程序降温盒中缓慢降温24h，然后置于液氮中长期保存。3.细胞复苏（1）将水浴锅温度调至37℃，取出冻存管快速置于水浴锅内，晃动冻存管直至管中冻存细胞融化；（2）将溶化的细胞冻存悬液转移至含有5-10倍体积完全培养基的离心管中，轻轻混匀；（3）室温300g离心10min；去除上清液，加入已回温的完全培养基重悬细胞，进行细胞计数，根据计数结果，取适量的细胞悬液接种到新的培养瓶内；（4）将复苏好的细胞转移至37℃，5%CO2培养箱中，按常规方法培养。
注意事项
1.试剂包装如有破损或滴漏，严禁使用。2.请遵守严格无菌的工作规范，操作过程避免污染。3.使用前应详细阅读使用说明书，在有效期内使用。4.该冻存液为非即用型冻存液，如果配制成即用型冻存液必须冷冻保存。
声明
仅用于科研使用，不能用于临床诊断和治疗。
保存条件
2°C-8°C避光保存，有效期18个月；
经理
业务员小张
业务员小谭
业务员小罗
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