| 中文名称 |
Fluo 3-AM（钙荧光探针） |
| 英文名称 |
Fluo 3-AM |
| CAS No. |
121714-22-5 |
| 有效期 |
2年 |
产品性质：
1. 外观：红色粉末
2. 纯度：≥90%（HPLC）
3. ： Fluo-3, AM 是最常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一。它穿透细
胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-3，从而被滞留在细胞内，Fluo-3 若以游离
配体形式存在时几乎是非荧光性的，但是当它与细胞内钙离子结合后可以产生较强的荧光，
最大激发波长为506nm，最大发射波长为526nm。实际检测时推荐使用的激发波长为
488nm 左右，发射波长为525～530nm。可以使用激光共聚焦显微镜或流式细胞仪检测细
胞内钙离子浓度的变化。
4. 操作说明（for Human T cells）
（1） 试剂 2 mM 的Fluo-3, AM/DMSO（将1mg Fluo-3, AM 溶于442μL DMSO）；Pluronic
F127；Hanks•balanced salt solution（HBSS）； HEPES buffer saline（10mM HEPES，1mM
Na2HPO4，137mM NaCl，5mM KCl，1mM CaCl2，0.5mM MgCl2，5mM glucose，0.1% BSA，pH 7.4）
（2） 操作
①. 向Fluo-3, AM/DMSO 溶液中加入16.5mg Pluronic F127，Pluronic F127 可以防止Fluo-3,AM 在HBSS 中聚合并能帮助其进入细胞。
②. 用HBSS 稀释Fluo-3, AM 溶液，制备4μM 的Fluo-3, AM 工作液。
③. 将Fluo-3, AM 工作液加入细胞，在37℃培养20 分钟。
④. 加入5 倍体积的含有1%胎牛血清的HBSS，再继续培养40 分钟。
⑤. 用HEPES buffer saline 洗涤细胞3 次，然后用HEPES buffer saline 使细胞重悬浮，制成1×105 cells/mL 的溶液。
⑥. 37℃下培养10 分钟，然后用该细胞进行荧光钙离子检测。激发波长506nm，发射波长
526nm。
标记的条件因细胞种类而异，在每次实验前，请先确定最佳条件。以上方法仅供参考。
储存条件：-20℃干燥避光保存，有效期一年。
经理
业务员小张
业务员小谭
业务员小罗
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