本产品为闪光型双荧光素酶报告基因检测试剂盒，可在同一反应中检测萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶的活性。
      双荧光素酶报告基因检测系统（Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit）是一种分别以荧光素和腔肠素为底物来检测萤火虫荧光素酶（Firefly Luciferase）和海肾荧光素酶（Renilla Luciferase）活性的报告系统。萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶的活性可在单个样品中依次检测。首先检测萤火虫荧光素酶活性，将萤火虫荧光素酶检测试剂加入样品中，定量萤火虫荧光强度，然后再在同一个样品中加入Stop & Reaction试剂，终止上述反应并同时启动海肾萤光素酶活性检测。在双萤光素酶报告基因检测系统中，两个荧光素酶在实验宿主细胞内均无内源活性。
      萤火虫荧光素酶是一种61 kDa的单体蛋白，可在翻译后立即发挥报告基因的作用[1,2]。只有荧光素、氧气、ATP和Mg2+同时存在时，萤火虫荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中，会发出波长为560 nm左右的生物荧光(bioluminescence)[3]。
      海肾荧光素酶是一种36 kDa的单体蛋白，从其天然来源海肾中纯化。海肾荧光素酶的底物和辅因子要求不同，反应过程无需ATP和镁离子参与。海肾荧光素酶催化的发光反应利用氧气和腔肠素（coelenterazine），发光颜色为蓝光，波长480 nm[4,5]。

                                            图1 双荧光素酶检测原理图

      一般情况下，海肾荧光素酶基因作为内参使用，将带有海肾荧光素酶基因的质粒与报告基因质粒共转染细胞；或是将两个报告基因构建到同一个质粒上，分别用不同的启动子驱动其表达。计算结果时，将萤火虫荧光素酶的检测值与海肾荧光素酶检测值进行相比，减少其它因素（如移液体积、细胞裂解效率和检测效率等）对实验准确性的影响，相当于做了标准化，使测试结果不受实验条件变化的干扰。