| 中文名称 |
凝血酶 |
| 英文名称 |
Thrombin |
| CAS No. |
9002-04-4 |
| 有效期 |
3年 |
凝血实验:凝血酶(Thrombin)来源于牛血浆,分子量37 KD,是由两条肽链(31 KD和6 KD)通过二硫键组成的。凝血酶是凝血酶原(凝血因子Ⅱ)激活后形成的蛋白质水解酶,其催化纤维蛋白原(fibrinogen)水解掉A肽和B肽,由此形成纤维蛋白单体,单体进一步聚合,在血小板、红细胞和白细胞等参与下形成血凝块。
标签切割:由于凝血酶具有切割序列专一性强,水解效率高的特点,它也被广泛地应用于基因工程产品的开发,其应用之一是作为工具蛋白酶用于重组融合蛋白质的特异性断裂,尤其适用于生物工程制药业及基因工程、生物化学、分子生物学等研究。凝血酶是一种广泛用于切割标签的蛋白酶,凝血酶最佳切割位点是X4-X3-P-R[K]-X1'-X2',这里X4和X3是疏水氨基酸而X1'和X2'是非酸性氨基酸,一些经常使用的识别位点是L-V-P-R-G-S,L-V-P-R-G-F和M-Y-P-R-G-N。在X4-X3-P-R-G-X2'之间切割比在X4-X3-P-K-L-X2'更有效。其他识别位点是X2-R[K]-X1', 这里X2或者X1'是甘氨酸,例如A-R-G和G-K-A,这里切割发生在第二个残基后。在凝血酶切割位点和N末端标签之间插入五个甘氨酸残基可改善切,通过这一"甘氨酸连接肽"只需较少酶量就可达到完全切割,而且也可以避免可能发生的错误切割。