| 中文名称 |
DNA甲基化转化与离心柱式纯化试剂盒 |
| 英文名称 |
甲基化检测样本前处理试剂盒 |
DNA经亚硫酸氢盐处理后，可使未甲基化的胞嘧啶转变为尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不变，进而实现甲基化碱基的识别。本试剂盒将DNA变性和亚硫酸氢盐转化过程整合为一步，极大缩短了转化时间而不影响转化效率，转化效率可达到99.5%以上。本试剂盒通过结合纯化柱，从亚硫酸氢盐修饰的溶液中回收DNA，回收的DNA纯度高，完整性好，可直接用于测序、甲基化PCR等下游实验。▪ 转化速度快：转化反应仅需70 min。▪ 转化回收效率高：未甲基化的胞嘧啶转化效率≥ 99.5%，回收率＞80%。▪ 投入量范围广：支持100 pg~2 μg范围DNA投入量。▪ 样本兼容范围广：支持粪便、血液、组织、体液等提取纯化后的DNA、cfDNA为起始样本。1. 转化效率高【实验1】以293细胞gDNA掺入1% Unmethylated Lambda DNA为模板，投入量分别为2 ng、10 ng、100 ng和500 ng，分别使用康为世纪CWY122以及行业标杆A公司的试剂盒进行亚硫酸氢盐处理及纯化，得到的核酸利用λ DNA甲基化特异性引物进行扩增，扩增产物依次进行AGE鉴定、胶回收、NGS建库及分析。图1：甲基化转化试剂盒的转化效率对比结果实验结果表明：康为世纪的甲基化检测样本前处理试剂盒胞嘧啶转化为尿嘧啶的效率在99.5%以上。2. 回收率高【实验2】以人甲基化DNA标准品为模板，分别使用康为世纪CWY122和行业标杆A公司的试剂盒进行亚硫酸氢盐处理及纯化，得到的核酸使用Nanodrop定量分析。图2：甲基化转化试剂盒的回收率对比结果实验结果表明：康为世纪的甲基化检测样本前处理试剂盒的回收率总体在80%以上，明显优于A公司。同时回收率会因样本类型、样本DNA片段大小、样本投入量以及样本质量而有所差异。
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