BDBIO 杂交瘤无血清培养基是一种无动物源，化学成分限定培养基。杂交瘤无血清培养基为初始培养基，含有4mM的谷氨酰胺，为杂交瘤细胞生长提供均衡的营养，与杂交瘤添加剂搭配使用可支持杂交瘤细胞的高密度培养。适用于人、小鼠和大鼠杂交瘤及骨髓瘤细胞的培养、单克隆抗体和重组蛋白的表达。 使用方法 直接适应 1.预热无血清培养基及添加剂，将添加剂按1：10的比例添加至无血清培养基，配制成杂交瘤完全培养基，杂交瘤细胞传代至完全培养基。在适应过程中，细胞传代密度应是正常传代密度的两倍。 2.监测细胞生长，直到活细胞密度达到1×106个活细胞/mL。在新鲜预热的杂交瘤完全培养基中传代至活细胞密度为1-2×105个活细胞/mL。 3.继续监测和传代细胞3-5代，细胞倍增时间不低于之前培养基时，认为此步骤培养基适应已经完成。 连续适应 1.将原培养基与杂交瘤完全培养基以3：1的比例混合，杂交瘤细胞接种至新鲜预热的混合后培养基。在适应过程中，传代密度应是正常传代密度的两倍。 2.监测细胞生长，直到活细胞密度达到1×106个活细胞/mL。将原培养基的比例逐步减少 （1：1，1：3，1：9），直至杂交瘤细胞接种于100%的杂交瘤完全培养基。传代密度为1-2x105个活细胞/ml。 3.继续监测和传代细胞，在100%完整的杂交瘤完全培养基中持续生长和存活几代后，细胞倍增时间不低于之前培养基时，认为此步骤培养基适应已经完成。 蛋白表达 1.杂交瘤细胞接种密度0.5-1×106/mL，培养温度36.5~37.0℃，pH:7.1±0.2，DO： 40%。（摇床中建议转速120rpm，振幅50mm,5-8%CO2）。 2.第一次补料：当细胞密度达到2.5×106/mL或培养48h时开始补第一次料：3%补料 +4mM谷氨酰胺，葡萄糖控制到4g/L； 3.第二次补料：当培养至96h时补第二次料：3%补料+4mM谷氨酰胺，葡萄糖控制到4g/L；当细胞活率低于50%时，培养结束； 注意事项 1.本产品使用过程中应注意无菌操作，避免污染。 2.试剂包装如有破损或滴漏，严禁使用。 3.为保持本产品的最佳使用效果，请勿进行冻融处理； 4.禁止使用超出规定有效期的产品。 5.由于本培养基含有谷氨酰胺，因此建议液体培养基超过3个月时补加2-4mM谷氨酰胺。 声明 仅用于科研使用，不能用于临床诊断和治疗。 保存条件 2℃-8°C避光保存，有效期12个月。