| 中文名称 |
超级转染试剂(RNAi) |
| 英文名称 |
Super Transfection Reagent (RNAi) |
超级转染试剂是一种便捷高效的阳离子聚合物,可以与带负电的核酸(包括质粒、siRNA、 寡聚核苷酸)形成复合物,通过胞吞作用将核酸转运到真核细胞内。BDBIO 超级转染试剂 (RNAi)能够将 siRNA 和 miRNA 高效输送到所有细胞中,并且允许在低 RNAi 浓度下就可获 得高效的靶基因敲低水平。
使用方法
以下转染的方法(以siRNA为例)已经充分的验证过,此试剂具有高效的转染效率,但针对
每种细胞,还是建议实验人员进行条件优化后展开实验。
一、细胞准备
1.根据细胞的生长速度,提前一天铺板,使细胞密度在转染当天达到60%-80%即可。
二、配置转染复合物
1.根据说明书,在Opti-MEMMedium中稀释siRNA和转染试剂。2.按照1:1的比例将稀释后的siRNA加入到稀释后的转染试剂中,室温孵育5min。三、细胞转染
1.根据说明书,将siRNA-转染试剂复合物加入到细胞板中。2.将细胞板置于37℃,5%CO2培养箱,培养24-72h,直至进行转基因表达分析。
(反向转染比正向转染更快,是高通量转染的首选方法。反向转染的方法是在孔内制备
复合物,然后加入细胞和培养基。由于细胞和siRNA-转染试剂复合物是在同一天制备的,
我们建议使用比常规转染方法多2.5倍的细胞。)
注意事项
1.4度保存,不可冷冻。避免反复或长时间开盖,防止脂质体氧化而影响转染效率。2.转染试剂不宜在室温放置过久,因此在制备转染复合物前从冰箱拿出,加完后应立即放回4℃再进行后续操作。3.转染复合物制备完成后室温孵育时间不得超过20min,因此建议将细胞铺好板后十字混匀,暂放于细胞培养箱内,再进行转染复合物的制备。4.siRNA应于-80℃保存。5.本产品使用过程中应注意无菌操作,避免污染。6.试剂包装如有破损或滴漏,严禁使用。7.操作人员万一与皮肤、粘膜接触,请立即用清水清洗。8.禁止使用超出规定有效期的产品。
声明
仅用于科研使用,不能用于临床诊断和治疗。
保存条件
2-8℃储存,有效期24个月。