BDBIO 超级转染试剂（替代 Lipo6666）是一种新型高效的阳离子聚合物。它可以与核酸 （包括质粒、siRNA、寡聚核苷酸）相互作用形成一种复合物将核酸转运到真核细胞内，适 用于大部分真核细胞的细胞转染，对难转染细胞表现出更大优势。本产品细胞毒性低，转染 后可不换液，也可在 4-6 小时后更换新鲜培养基。对高密度细胞保持高转染效率，在细胞密 度 90%以上仍具有很高的转染效率。血清不影响转染效率，可将转染复合物直接加入完全培 养基中，可减少去除血清对细胞的损伤。用量少，通常情况下对于 24 孔板转染，每次用 1- 2μL，1mL 可做 500-1000 次转染；对于 6 孔板，每次用 4-8μL，1mL 约可做 125-250 次 转染。 使用方法 一、细胞准备（以24孔板为例）贴壁细胞：转染前一天，胰酶消化细胞并计数，按照每孔2-8×105个细胞的量进行铺板，使其在转染时密度为80-100%。悬浮细胞：转染当天，配制DNA复合物之前，24孔板中细胞铺板，每500µL生长培养基中加入4-10×105细胞。*铺板时可使用抗生素，但转染时候切记移除抗生素。*高细胞密度仍具高转染效率，建议细胞密度大于90%。二、转染复合物的配置：1.使用50μL无血清培养基（如DMEM或Opti-MEM培养基）稀释0.5μgDNA，涡旋混匀。2.使用50μL无血清培养基（如DMEM或Opti-MEM培养基）稀释0.6-2.5μL转染试剂。转染试剂稀释后室温孵育2-5min（在30min内同稀释的DNA混合，保温时间过长会降低活性）。*如果DMEM作为脂质体核酸转染试剂的稀释液，必须在5min内同稀释的DNA混合。*转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响，建议初次使用时设置梯度优化最佳使用量。三、细胞转染：1.混合稀释的DNA和稀释的转染试剂（总体积100µL），轻轻混匀，并在室温孵育20min。此时溶液可能会混浊，但不会影响转染。DNA-转染试剂复合物室温至少稳定保存5h。2.将100µLDNA-转染试剂复合物滴加到24孔细胞板中（细胞板中培养基为400µL），轻轻晃动细胞板混匀。*如需无血清条件转染，加入复合物前将含血清培养基替换为无血清培养基即可。3.37℃，5%CO2培养箱培养18-48h，直至进行转基因表达分析，无需去掉复合物或更换培养基。如需要，可在转染后4-6h后更换生长培养基，不会降低转染效率。 注意事项 1.本产品可用于有血清培养基的转染，并且转染前后不需要换培养基。但是，制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释DNA和转染试剂，因为血清会影响复合物的形成。2.高细胞密度仍具高转染效率，建议细胞密度大于90%，有利获得更高的蛋白表达。3.铺板时可使用抗生素，但转染时应换液将抗生素移除。4.使用高纯度的DNA或RNA有助于获得较高的转染效率，并去除内毒素。5.本产品置于4度保存，不可冷冻。避免反复或长时间开盖，避免脂质体氧化而影响转染效率。6.初次使用建议优化DNA和转染试剂用量以获得最佳转染效率。DNA和转染试剂的比例，通常推荐是1:2-1:3，例如使用0.5µgDNA和1-1.5µL转染试剂。可根据试剂情况进行优化调整。 声明 仅用于科研使用，不能用于临床诊断和治疗。 保存条件 2-8℃保存，有效期24个月。